Histopathology Assignment(pencelupan khas)

1.    1. Perl’s  Prussian Blue

TUJUAN :

Demonstrasi iron, hemosiderin

PRINSIP :

Teknik ini dilakukan dengan merawat  slaid bertisu dengan asid

hidroklorik cair. Ini akan menyebabkan  ion ferik dibebaskan daripada komponen

proteinnya. Ion yang terbebas ini kemudiannya akan bertindak balas dengan kalium

ferosianida bagi menghasilkan warna biru. Teknik ini didapati amat sesuai jika tisu

tersebut difiksasikan menggunakan fiksasi beraksa.

KEPUTUSAN :

Iron positive material – blue

Other – dark pink

TISU KAWALAN :

Liver

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Hemochromatosis

atas, perls prussian blue on liver

1.     2.Masson Fontana

TUJUAN :

Mendemonstrasi melanin dan argentaffin granules.

PRINSIP:

granul melanin yang bertaburan dalam sitoplasma melanosit akan diturunkan kepada amonia pekat nitrat. Pada pemerhatian di bawah mikroskop bahan ini akan berwarna gelap.

KEPUTUSAN :

Melanin, argentaffin – black

Nuclei - red

TISU KAWALAN : Skin, small intestine

KEPENTINGAN KLINIKAL :

-          Amelanotic malignant melanoma

-          Carcinoids tumors

masson fontana stain

PENCELUPAN KARBOHIDRAT

1.   1.  PAS

TUJUAN :

Glycogen hadir dalam kulit, hati, parathyroid gland, otot skeletal dan otot kardiak.

Untuk mendemonstrasi fungus, basement membrane, polisakarida dan mucosubstances.

PRINSIP :

Perodik asid oksidasikan karbon kepada ikatan karbon membentuk aldehyde yang bertindak balas kepada fuchsin-sulfurus asid yang membentuk warna magenta.

KEPUTUSAN :

Glycogen,fungus – magenta

Nuclei – blue

TISU KAWALAN :

Liver

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Ewing’s sarcoma

Nodular glomerulosclerosis

Gastric signet ring cell carcinoma histopatholgy PAS stain 

4.d-PAS

TUJUAN :

Mendemonstrasi glycogen

PRINSIP :

Diastase bertindak ke atas glycogen dan mempolimerasinya menjadi unit gula yang lebih kecil seperti malosa dan glukosa, yang akan dibilaskan dari seksyen.

KEPUTUSAN :

Glycogen – negative

Fungus – magenta

Nuclei – blue

TISU KAWALAN :

liver

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Malignant melanoma

Periodic Acid-Schiff (PAS) stain. (A) Strong reaction with PAS is evident within the cytoplasm of the polygonal cells. (B) Staining disappears in the presence of diastase.

5.Alcian blue

TUJUAN :

Mendemonstrasi mucosubstances dan acetic mucins

PRINSIP :

Alcian blue adalah copper phthalcyanin dye dan mengandungi positif chargely group yang boleh mengesan salt linkage dengan polyanions.

Polyanions terdiri daripada sulfat dan carbocyl radicals oleh acid mucins.

Kepelbagaian pH larutan alcian blue boleh didapati berdasarkan jenis acid mucin yang hadir.

KEPUTUSAN :

Acid mucosubstance – blue

Nuclei – pink to red

Cytoplasm – pale pink

TISU KAWALAN :

Small intestine

Appendix

Colon

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Mucoepidermoid carcinoma

alcian blue stain

6.Alcian Blue PAS

TUJUAN :

Untuk membezakan neutral dan asid mukosubstan.

PRINSIP :

This stain demonstrate the presence of mucin and clearly distinguishes between acid and neutral mucins. By first staining all acid mucins with alcian blue, those acid mucins which are also PAS positive will not react with subsequent PAS reaction, only the neutral mucins.

KEPUTUSAN :

Acid mukosubstance – blue

Neutral polysaccharides – magenta

TISU KAWALAN :

Large bowel

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Mucopidermoid carcinoma

Thyroid carcinoma

 Alcian blue-PAS stain

7. Mucicarmine stain

TUJUAN :

Untuk mencelup asid mucopolisakarida (mucin ) yang dihasilkan dari pelbagai sel epithelia dan sel tisu penghubung.

PRINSIP :

Aluminium membentuk kompleks chelating dengan carmine membolehkan penukaran molekul kepada cas positif yang akan bergabung dengan asid substrate mucin.

KEPUTUSAN :

Mucin – deep rose

Nuclei – black

Other element – yellow

TISU KAWALAN :

Lung

Small intestine

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Lung carcinoma

Colonic adenocarcinoma

mucicarmine stain of AIDS patient on lung

mucicarmine stain of cardiac myxoma with glandular differentiation 

PENCELUPAN KOLAGEN

8. Masson Trichrome

TUJUAN :

Mendemonstrasi connective tissue.

Mendemonstrasi otot, collagen fibre, fibrin dan erythrocyte

PRINSIP  :

Tisu yang kurang porous akan diwarnakan oleh molekul pewarna yang kecil manakala molekul pewarna yang besar mempunyai kuasa penembusan yang tinggi akan mewarnakan molekul yang lebih porous.

KEPUTUSAN :

nuclei – black

Collagen – blue/green

Cytoplasm, muscle, erythrocyte - red

 TISU KAWALAN : Skin,arteri

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Melanoma

 Squomous carcinoma

Masson trichrome stain on skin

9. Van Gieson

TUJUAN :

Mendemonstrasi tisu penghubung.

Sesuai untuk coarse collagen fibre,tapi tidak sesuai untuk fine collagen fibre atau muscle collagen.

PRINSIP :

Acid fuchsin yang bermolekul besar lebih diserap oleh serat kolagen manakala asid pikrik dapat tembusi sitoplasma otot. Pencelupan Van Giesons selalu digunakan bersama iron hematoxylin.

KEPUTUSAN :

Nuclei-biru/hitam

Sitoplasma,otot – kelabu/kuning

Sel darah merah – kuning

Kolagen-merah

TISU KAWALAN : kulit, arteri

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Vascular hipertensi

Cirrhotic liver

(A)myocardial interstitial fibrosis (B) normal tissue. Van Gieson staining

van gieson staining

PENCELUPAN FIBER ELASTIK

10. Verhoeff EVG

TUJUAN :

Mendemonstrasi elastic fibre

PRINSIP :

Tisu dicelup dengan regressif hematoxylin yang terdiri daripada ferrik klorida dan iodine.

Ferrik klorida digunakan sebagai pembeza warna dan klagen dicelupbalas dengan pencelup Van Gieson.

Tisu elastik mempunyai affinity kuat kepada kompleks iron hematoxylin dan akan mempertahankan pewarna lebih lama dari elemen tisu yang lain.

KEPUTUSAN :

Nuclei and elastic fibre – black

Collagen fibre – red

Background  - yellow

TISU KAWALAN :

Dermis of skin

Artery

Kidney

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Arteriosclerosis

Emphysema

verhoeff EVG

elastic tissue on verhoeff EVG stain

11. Weigert’s Resocinol Fuchsin

TUJUAN :

pencelupan progresif untuk demonstrasi elastic fibers

PRINSIP :

Mekanisma pencelupan belum difahami sepenuhnya. Tetapi kompleks asas fuchsin brtindak sebagai ‘iron resocsin lake’ yang mengikat elastin dan menghasilkan warna hitam.

Ini dipengaruhi oleh oksidasi ikatan sulfide untuk menghasilkan kumpulan asid sulfonik yang bercas negatif.

KEPUTUSAN :

Elastic fibers – hitam biru

Collagen – pink-red

Nuclei – biru hitam

Tisu lain-yellow

TISU KAWALAN :

Kulit, paru-paru, jantung

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Arteriosclerosis

Temporal arteritis

Vascular hypertensive

PENCELUPAN OTOT

12. PTAH(Phosphotungstic acid-hematoxylin)

TUJUAN:

Untuk mendemonstrasi jaluran lintas otot dan fibrin

PRINSIP :

Tisu akan dioksidakan dengan kalium permanganate kemudian diluntur warna dengan 5% asid oksalik. Kemudian, tisu dicelup dengan asid fosfotungstik 1% yang berperanan sebagai mordant.

Pencelupan ini dikenali sebagai pencelup polychrome kerana satu larutan memberikan dua warna utama.

KEPUTUSAN :

Cross striations, fibrin, glial fibers – dark blue

Nuclei,clia,red blood cell  – blue

Collagen,cartilage,elastic fibres – red brown

Cytoplasm – pale pinkish brown

TISU KAWALAN :

 skeletal or cardiac muscle

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Surfacepappilary carcinoma

Oncocytic carcinoma

PTAH demonstrate striation in skeletal muscle

 PTAH on tongue

PENCELUPAN RETIKULIN

13. Gordon and Sweet

TUJUAN :

Teknik pengenapan silver yang digunakan untuk mewarnakan fiber retikulin dengan warna hitam

Untuk mengenalpasti pituitary lesions dan vascular malformations.

 PRINSIP :

Silver dari silver oxide dipilih secara selektif dimendapkan pada serat retikulin yang akan diwarnakan hitam apabila dikurangkan oleh reducing agent, formalin. Gold chloride digunakan sebagai toner untuk member gambaran jelas pada latar belakang. Silver yang yang masih ada disingkirkan oleh sodium thiosulphate.

KEPUTUSAN :

Reticulin fibres – black

Nuclei – black

Background - red

TISU KAWALAN :

Spleen

Liver

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Hepatocellular carcinoma

Myelosclerosis

Liver cirrhosis

Gordon and Sweet staining

PENCELUPAN MIKROORGANISMA

14. Wade Fite

TUJUAN :

Mendemonstrasi Mycobacterium leprae

PRINSIP :

The more gentle dewaxing of this section, and the minimal exposure to organic solvents, protect the rather precarious acid and alcohol fastness of the organism.

KEPUTUSAN :

bakteria – merah

Latar belakang - biru

TISU KAWALAN :

Tisu yang positif Mycobacterium leprae

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Lepromatous leprosy

Lipoblastoma

both, wade fite staining

15. Ziehl Neelson

TUJUAN :

Untuk mengesan kuman TB

PRINSIP :

Dengan menggunakan pencelup kuat yang mengandungi phenol serta dengan haba pencelup itu terpaksa menembusi bacillus dan mewarnakannya.

Bahan – bahan peluntur akan melunturkan warna pada semua benda yang terdapat pada palitan kecualikan AFB.

KEPUTUSAN :

Acid fast bacilli – bright red

Background - blue

TISU KAWALAN :

Tisu yang mempunyai acid fast bacilli

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Tuberculosis

Cryptosporidium

Mycobacterium with ziehl nelson stain

PENCELUPAN FUNGI

16. Gram

TUJUAN :

Demonstrasi fungi

PRINSIP :

Bakteria yang ‘gram positif’ tidak luntur warna dan mengekalkan warna ungu gelap sementara ‘gram negatif’ akan dilunturkan warna dan dicelup balas dengan safranin, basic fuchsin, neutral red, atau cerbal fuchsin yang cair.

KEPUTUSAN :

Gram positif – biru hitam

Gram negative – merah

TISU KAWALAN :

Intestine with gram positive cocci

Liver with gram negative rods bacilli

Adipose tissue

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Staphylococcus aureus

E. coli

intestine with gram positive cocci

liver with gram negative rod

17. Giemsa

TUJUAN :

Untuk demonstrasi protozoa

PRINSIP :

Pencelupan “Romanowsky-type” yang mengandungi methylene blue, azure dan eosin.

Methylene blue adalah pencelupan metakromatik dimana granul,cartilage,mucin dan komponen tisu akan diwarnakan ungu bukan biru.

KEPUTUSAN :

Mast cell granules -  purple.

Nuclei  - blue.

Cytoplasm  -  pale blue.

TISU KAWALAN :

Spleen

Small intestine

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Giardia

Helicobacter

both, giemsa stain with helicobacter

18. Grocott Methenamine Silver

TUJUAN :

Demonstrasi fungi

PRINSIP :

Komponen mucopolysaccharide dari dinding sel fungi yang troksida untuk melepaskan kumpulan aldehid.

Kumpulan aldehid kemudian bertindak balas dengan silver nitrat, diturunkan kepada metallic silver, sel fungal kelihatan.

KEPUTUSAN :

Fungi – hitam

Background – hijau/pink merah

TISU KAWALAN :

tisu yang mengandungi fungus.

bllok kawalan diambil dari tisu yang mengandungi aspergil losis dan pneumocyst disyorkan.

KEPENTINGAN KLINIKAL :

Aspergellus fumigates

Candida albicans

Actinomyces israelli

(5)GMS stain 

Bone marros's of GMS stain 

nota: org buka group 'anak mama nani' kat fb. dan classmate org, siti sarah.. dgn baik hatinya dia mengepostkn bkaitan pencelupan yg digunakan dlm makmal histopatologi.utk cuti midsem skng ni.. intake org, masing2 sibuk tuk siapkan assigment yg penyelaras modul bg pd kteorg..naik cuti ni kami perlu hantar.anyway, sarah jazakillah.. tuk student MLT, ambil lah sbg rujukan..